مواد و روشها
2-1-حیوان آزمایشگاهی
برای انجام این پژوهش از موش های بزرگ آزمایشگاهی (Rat) نر بالغ از نژاد Wistar با میانگین وزنی 20±200 گرم استفاده گردید. این موش های بزرگ با وزن 120 گرمی از انستیتو رازی در حصارک کرج تهیه گردیده و سپس به حیوان خانه دانشگاه علمی-کاربردی رسول اکرم منتقل شدند وموشها در قفس های مخصوص نگهداری رت، به صورت گروه های 4-3 تایی نگهداری شده، آب و غذای مخصوص(پلت) که از شرکت خوراک حیوانات آزمایشگاهی جوانه خراسان از مشهد تهیه شده بود، به میزان کافی در دسترس آنها قرار گرفت. محل نگهداری حیوانات از نظر شرایط فیزیکی دارای دوره روشنایی – تاریکی 12 ساعته (7 صبح تا 7 شب ) و دمای 2±22 درجه سانتیگراد بدون هر گونه سرو صدا و آلودگی صوتی بود. درجه رطوبت نیز ثابت نگه داشته شد. بعد از به وزن رسیدن در این مکان و پس از ضدعفونی کردن کامل محل حیوان خانه دانشگاه آزاد واحد دامغان به این مکان منتقل شدند و در این مکان نیز دقیقا نکات فوق رعایت شد. برای آنکه استرس و ترس ناشی از جابه جایی حیوانات از بین برود و در مکان جدید عادت و سازش پیدا کنند، یک هفته به حیوانات زمان داده شد.
آزمایشات مورد نظر در زمان معینی از روز انجام می گرفت.
شکل2-1-1- موش آلبینو نر نژاد ویستار
2-2 وسایل و ابزارهای آزمایشگاهی مورد نیاز جهت انجام آزمایش
1- ترازوی Ohaus جهت وزن کردن موش ها با دقت یک دهم گرم.
2- تیغ اصلاح جهت اصلاح نمودن موهای سر حیوان.
3- تعداد زیادی سرنگ انسولینی یک میلی لیتری برای تزریق دارو (به تعداد هر حیوان یک عدد )
4- لوازم تشریح (قیچی، اسکالپل، گیره، پنس، ظرف تشریح و غیره)
5- تعداد زیادی سرسرنگ Gauge 21 از جنس فولاد زنگ نزن برای ساخت کانول تزریق.
6- ابزار کولیس با دقت 5/0 میلی متر.
7- تیغ موکت بری (Cutter)
8- کاغذ سمباده.
9- چراغ مطالعه.
10- پیچ های ظریف عینک به تعداد زیاد به منظور تثبیت سیمان دندانپزشکی و کانول راهنما برروی استخوان جمجمه.
11- پیچ گوشتی عینک و پنس ظریف مخصوص جهت نگهداری پیچ های مورد نظر.
12- سرمته دندانپزشکی به قطر 7/0 و 1 میلی متر جهت سوراخ کردن استخوان جمجمه.
13- پنبه استریل و سواپ به مقدار مورد نیاز.
14- دستگاه استریوتاکس مدل Stoelting ساخت شرکت Stoelting آمریکا با استفاده ازاین دستگاه موش برای انجام عمل جراحی و کانول گذاری در ناحیه بطن کاملا ثابت نگه داشته می شد.
15- سرنک هامیلتون ساخت چین با حجم 5 میکرو لیتر.
16- سرسرنگ Gauge27 دندانپزشکی برای ساخت کانول تزریق.
17- لوله پلی اتیلنی به عنوان رابط بین سرنگ هامیلتون و کانول تزریق.
18- ترازوی Sartorius analytic برای وزن کردن داروها با دقت یک ده هزارم گرم.
19- ظروف شیشه ای درب دار استریل جهت تهیه مواد شیمیایی و عصاره.
20- دستگاه روتاری ( جهت حذف حلال).
21- قیف بوخنر.
22- بن ماری.
23- بوته چینی.
24- دستگاه Elevated Plus-maze از جنس چوب.
25- سه عدد کورنومتر دیجیتال جهت اندازه گیری زمان توقف موش ها در هر بازوی دستگاه Elevated Plus-maze و همچنین یک عدد ساعت شماطه ای برای تنظیم نمودن زمان ثبت.
26- ظروف شیشه ای یا پلاستیکی جهت نگهداری مغز حیوان.
2-3-مواد و داروهای مورد نیاز
1- 10% Chetamine و 2% Xylazine ساخت شرکت داروهای دامپزشکی ایران، به عنوان داروی بیهوشی.
2- عصاره الکلی 50% دانه گیاه جوز بوآ.
3- پنتیلن تترازول (PTZ) تهیه شده از شرکت SIGMA USA , USA .
4- الکل طبی 96 درصد.
5- آب مقطر.
6- سرم فیزیولوژیک 9/0 درصد نمکی (نرمال سالین).
7- بتادین برای ضد عفونی کردن محل جراحی.
8- سیمان دندانپزشکی ( پودر آکریل ) و محلول منومر خودپخت (صنایع پزشکی مارلیک ) جهت تثبیت کانول راهنمای ساخته شده.
9- کلروفرم یا اتر جهت کشتن حیوان پس از اتمام آزمایش.
10- فرمالین 10% برای تثبیت بافت مغز.
11- پنیسیلین 1.200.000 به مقدار نیاز.
2-4- گیاهان
گیاه جوزبویا به دلیل بومی بودن در هند به صورت خشک تهیه شد. همچنین گیاه خرزهره نیز به دلیل بومی بودن در آسیا به راحتی از دامغان تهیه و به لحاظ بیوسیستماتیکی نیز جنس و گونه این گیاهان توسط بخش بیوسیتماتیک دانشکده فردوسی مشهد مورد تایید قرار گرفت.(Myristica fragrans) و (Nerium oleander )
2-5- روش عصاره گیری
جهت عصاره گیری از جوزبویا و خرزهره از روش خیساندن الکلی با درصد الکل 50 برای گیاه جوزبویا و برای گیاه خرزهره از درصد الکل 70 تهیه شد(106).
بررسی تاثیر عصاره جوز بدون داروی PTZ و عصاره خرزهره به همراه پنتیلن تترازول در بروز رفتار ترس - 165 صفحه فایل ورد word