پایان نامه بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش(ورد-87صفحه)

اختصاصی از فایلکو پایان نامه بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش(ورد-87صفحه) دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

عنوان : بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش

چکیده :

اطلاع از مسیرهای متابولیسم دارو نقش مهمی در درک سمیت دارو دارد. این اطلاعات می توانند در طراحی داروهای جدید و روشن کردن مکانیسم سرطان زایی ترکیبات شیمیایی به کار روند. از
این رو یافتن روشی مناسب برای بررسی متابولیسم داروها گام مهمی در جهت رسیدن به دیگر اطلاعات  با ارزش در مورد داروها است. متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان، خرگوش و موش صحرایی بررسی شده است. طبق نتایج به دست آمده از این مطالعات نوسکاپین از دو مسیر o- دمتیلاسیون و شکسته شدن پیوند C1-9 متابولیزه می شود و مکونین به عنوان محصول عمده متابولیسم آن شناخته شده است. در این تحقیق متابولیسم نوسکاپین توسط یک روش ex vivo، سلولهای جدا شده کبدی، مورد بررسی قرار گرفت این روش از چند جنبه دارای اهمیت است: این روش حد واسط مناسبی بین روشهای قبلی مانند آنزیم های حل شده، فراکسیون ارگان جدا شده و مطالعه مستقیم روی حیوان کامل است. این سلولها خصوصیات لازم بافت دست نخورده مانند نفوذپذیری غشا را دارا هستند از این رو در بسیاری از مطالعات بیوشیمیایی به کار می روند.

در این تحقیق سلولهای کبد موش صحرایی طی یک فرآیند دقیق جدا شدند و زنده بودن آنها با آزمایش منع تریپان آبی %1/0 و مشاهده میکروسکوپی سلولها تأیید شد. شناسایی استاندارد داروی نوسکاپین و متابولیت اصلی آن، مکونین توسط روش HPLC صورت گرفت. اگر چه استانداردهای نوسکاپین و متابولیت اصلی آن در محلولهای Spike شده مشاهده شدند اما این روش قادر به شناسایی متابولیت ها در عصاره سلولی نبود. به نظر می رسد که افزایش حساسیت روش به مشاهده همزمان نوسکاپین و متابولیت ها کمک کند.

فهرست مطالب

بخش اول: مقدمه

مقدمه

1-1- اوپیوییدها

1-1-1- تاریخچه

1-1-2- آلکالوییدهای تریاک

1-1-3- پپتیدهای اوپیویید درون زاد

1-1-4- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف

1-1-5- مصارف بالینی اوپیوییدها

1-2- متابولیسم

1-2-1- تاریخچه

1-2-2- کلیات متابولیسم

1-2-3- مکان های متابولیسم داروها

1-2-4- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی

1-2-5- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم

1-2-6- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم

1-3- جداسازی سلولهای کبد

1-4- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش..

1-5- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC

1-5-1- تاریخچه

1-5-2- اساس کروماتوگرافی

1-5-3- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع

1-5-4- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا

1-5-5- اساس دستگاه HPLC

1-6- نوسکاپین

1-6-1- برخی اثرات نوسکاپین

1-6-2- فارماکوکینتیک نوسکاپین

1-6-3- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین

بخش دوم: روشها و مواد

2-1- اهداف مطالعه

2-2- دستگاه ها و وسایل

2-3- مواد

2-4- تهیه بافرهای پرفیوژن

2-4-1- محلول Stock بافر هنکس با غلظت 10 برابر

2-4-2- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت 2 برابر

2-4-3- بافر هنکس یک

2-4-4- بافر هنکس دو

2-4-5- بافر کربس آلبومین 

2-4-6- بافر کربس- هپس

2-5- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت 6خانه

2-6- محیط کشت

2-6-1- مراحل تهیه محیط کشت: (1:1) DMEM, F12

2-7- سرم جنین گاو (FBS)

2-8- کیت استریل پرفیوژن

2-9- تهیه هپاتوسیت های تازه

2-9-1- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش

2-9-2- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش

2-9-3- تهیه نمونه برای انجام آنالیز

2-10- روش سنتز مکونین (6 و 7- دی متوکسی فتالید)

2-11- دلایل انتخاب HPLC

2-11-1- مشخصات دستگاه HPLC

2-11-2- انواع روش های HPLC آزمایش شده

2-11-3- روش تهیه بافر 10X استات با 4 pH=

2-11-4- روش تهیه بافر فسفات سدیم Mm 25 با 5/4 pH=

2-12- استخراج متابولیت از ادرار انسان

بخش سوم: نتایج

3-1- جداسازی سلولهای کبد

3-2- سنتز مکونین

3-3- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)

بخش چهارم: بحث و نتیجه گیری

4-1- جداسازی سلول های کبد موش

4-2- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)

4-3- متابولیسم نوسکاپین

4-4- متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان

خلاصه انگلیسی

منابع

اختصارات

دانلود پایان نامه در مورد بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش

اختصاصی از فایلکو دانلود پایان نامه در مورد بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

ارزانتر از همه جا

(مجموعه مقالات و پایان نامه ها)

دانلود پایان نامه در مورد بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش

هدیه ویژه:

قلق های پایان نامه نویسی از شروع تا دفاع

کتاب داروی شگفت انگیز جورج

اختصاصی از فایلکو کتاب داروی شگفت انگیز جورج دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

طفلکی جورج! مادر بزرگی دارد که بدجنس ترین و ترسناک ترین مادر بزرگ دنیاست. او هر روز، کنار پنجره مینشیند و مدام غر می زند و 

دنبال بهانه ای می گردد تا جورج را اذیت کند . آیا جورج با این وضع

میتواند راحت زندگی کند. البته که نه! پس باید راهی پیدا کند....

نویسنده : رولد دال

67صفحه

بررسی علمی شیر مادر و مقایسه آماری داروی متوکلوپرامید و قطره گیاهی شیرافزا در تحریک ترشح شیر

اختصاصی از فایلکو بررسی علمی شیر مادر و مقایسه آماری داروی متوکلوپرامید و قطره گیاهی شیرافزا در تحریک ترشح شیر دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

« مقدمه »

کلیه سازمانهای مهم ملی و بین‌المللی بهداشت و گروههایی که با تغذیه مادر و کودک سر و کار دارند، تغذیه با شیر مادر را برای نوزادانی که به موقع متولد شده اند ، ‌توصیه می‌کنند. دلیل این امر آن است که شیر مادر بهترین انتخاب برای شیردهی نوزاد است و حاوی حدود 200 ماده می‌باشد که توسط غدد شیری در پاسخ به تقاضای نوزاد و مکیدن او تولید می‌شود.

در مهر ماه سال 1369 در محل سازمان ملل متحد، ترویج تغذیه با شیر مادر به عنوان یکی از اهداف مهم به تصویب رسید. سپس در مرداد ماه سال 1370 در ایتالیا برنامه‌ای تدوین گردید مبنی بر اینکه مادران شیرده باید بتوانند تا 6 ماهگی نوزاد را فقط با شیر خود و بعد به همراه تغذیه کمکی تا 2 سالگی شیر دهند. در این رابطه، توصیه آکادمی کودکان امریکا این است که نوزادان باید به مدت 4 تا 6 ماه فقط از شیر مادر تغذیه شوند.

مطالعات پزشکی فراوان بر روی شیر مادر، نشان داده است که در طی زمان شیردهی، ترکیب شیر لحظه به لحظه تغییر می‌کند. این تغییر متناسب با نیاز نوزاد و به منظور تغذیه ایده‌آل او در جهت رشد و تکامل است و هرگز دو مادر، شیر با کیفیت یکسان تولید نمی‌کنند.

با گذشت زمان و صنعتی شدن جوامع، تعداد قابل توجّهی از مادران، تمایلی به شیردهی ندارند، یا به دلایل مختلف از جمله اشتغال و تحصیل و در نتیجه عدم حضور در منزل به منظور شیردهی و از طرفی به دلیل مشکلات روحی و جسمی، فرزندان از نعمت شیر مادر محروم می‌شوند.

آخرین آمار منتشر شده از سوی وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشکی از کل کشور (مهر ماه سال 1379)، نشان می‌دهد که تغذیه انحصاری با شیر مادر تا 6 ماهگی در کل کشور 1/44 درصد بوده است. همچنین این رقم در استان تهران (جدا از شهر تهران) 8/38 درصد می‌باشد. در شهر تهران نیز این بررسی، عدد 1/38 درصد را نشان می‌دهد که متأسّفانه نتایج مذکور چه در کل کشور و چه در استان تهران و شهر تهران، رضایت بخش نیست و هنوز آگاهی مادران از ضرورت تغذیه انحصاری با شیر مادر کافی نیست.

حل این مشکل نیازمند افزایش آگاهی عمومی خانواده‌ها و نیز بالا بردن دانش تخصصی پزشکان، داروسازان به عنوان مشاور پزشک و راهنمای بیمار،‌ کارشناسان تغذیه و بالاخره ماماها و فراهم آوردن شرایطی برای مادران است که شیر کافی برای شیردهی داشته باشند و بتوانند تغذیه انحصاری کودک را ادامه دهند. به همین منظور تحقیقی صورت گرفت و 200 پزشک (76 نفر متخصص اطفال – 92 نفر متخصص زنان - زایمان و 32 نفر ماما) در سطح شهر تهران (شمال – جنوب – شرق و غرب) و کرج بزرگ ملاقات گردیدند، به منظور تعیین اینکه 1- در مواجهه با مادران شیرده با شیر کم چه پیشنهاد می‌کنند؟ 2- کدامیک از دو داروی شیرافزا (گیاهی) و متوکلوپرامید (شیمیایی) را جهت افزایش شیر مادران تجویز می‌کنند؟

البته تحقیقاتی در بعضی شهرهای ایران صورت گرفته است از جمله :

تعیین درصد شیرخواران مصرف کننده شیر خشک و عوامل مؤثر در استفاده از آن نزد شیر خواران مناطق شهری و روستایی شهرستان تاکستان از استان قزوین (سال 1377). بررسی عوامل مؤثر بر تغذیه با شیر مادر در مادران مراجعه کننده به مراکز بهداشتی – درمانی شهر تبریز (74-1373).

بررسی طول مدت شیردهی و علل قطع زودرس شیر مادر در زنان ساکن تهران (1368). نیز تحقیقی با عنوان بررسی و شناخت برخی از ویژگیهای بیوشیمیایی شیر مادران ایران و نیز بررسی وضعیت رشد و نقش تغذیه با شیر مادر در کودکان صورت گرفته است.

با بررسی که در مورد انجمن‌های فعّال در کل کشور انجام شد، مشخص گردید که در حال حاضر یک انجمن غیر دولتی (N.G.O) در تهران با نام انجمن حمایت از شیر مادر مشغول به کار است. البته یک انجمن به نام انجمن تنظیم خانواده نیز در تهران وجود دارد که به صورت محدود در مورد شیر مادر برنامه دارد. در هیچ شهر دیگری در ایران، انجمن حمایت از شیر مادر تشکیل نشده است. وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشکی در بخش بهداشت خانواده نیز در این زمینه فعالیت دارد.

فهرست مطالب :

چکیده

مقدمه

فصل اول : کلیات

1-1- آناتومی پستان

1-2- بافت شناسی پستان

1-3- فیزیولوژی پستان

1-4- تاریخچه کشف هورمون پرولاکتین و شرح اعمال آن در شیردهی از دیدگاه بیولوژی سلولی

الف- تاریخچه کشف پرولاکتین

ب- مهار عمل پرولاکتین

ج- محرکهای پرولاکتین

د- اعمال پرولاکتین از دیدگاه بیولوژی سلولی

هـ ارزیابی پرولاکتین

و- نقش پرولاکتین در لاکتوژنز

1-5 شیر مادر، محتویات و فواید آن

الف- آغوز (کلستروم)

ب- بررسی تفاوت آغوز و شیر موقتی

ج- محتویات و فواید شیر مادر

1-6- تغذیه با شیر مادر

الف- ناکافی بودن شیر مادر

ب- موارد قابل توجه در طی شیردهی

ج- جلوگیری از بارداری در زمان شیردهی

د- از شیرگیری

1-7- اثرات شیر مادر بر سیستم‌های گوناگون بدن نوزاد

الف- تأثیر شیر مادر بر استخوان سازی نوزاد

ب- تأثیر شیر مادر بر رشد و تکامل سیستم عصبی نوزاد

ج- تأثیر شیر مادر بر سیستم ایمنی نوزاد و حمایت ایمونولوژیک غیر قابل جایگزینی آن

د- تأثیر شیر مادر بر تعادل وزن، قد و رشد نوزاد

هـ تأثیر شیر مادر بر سیستم تنفسی نوزاد

و- تأثیر شیر مادر بر سیستم قلب و عروق نوزاد در سالهای آتی زندگی

ز- تأثیر شیر مادر بر سیستم گوارشی نوزاد

ح- تأثیر شیر مادر بر سیستم شنوایی نوزاد

ط- تأثیر شیر مادر بر کاهش میزان کم خونی نوزاد

ی- تأثیر شیر مادر در پیشگیری از دیابت نوع 2

ک- تأثیر تغذیه با شیر مادر بر مننژیت ناشی از هموفیلوس آنفلوآنزا

1-8- فواید شیردهی بر مادر شیرده

1-9- مقایسه محتوای شیر مادر با شیر گاو

1-10- محتوای شیر خشک و مضرات آن در مقایسه با شیر مادر

1-11- خطرات شیرخشک

1-12- موارد منع شیردهی

1-13- مادران شیرده شاغل

1-14- تأثیر الکل بر شیردهی

1-15- تأثیر سیگار بر شیردهی

1-16- بیماریهای پستان

1-16-1- ناهنجاریهای رشد پستان

1-16-2- ترشّحات غیر طبیعی پستان

1-16-3- غدد پستان

1-16-4- ترک و زخم نوک پستان، راههای پیشگیری و درمان

1-16-5- پدیده رینود

1-16-6- حساسیت موضعی پستان

1-16-7- تورم و پرخونی پستان

1-16-8- التهاب پستان

1-16-9- آبسه پستان

1-17- شیردهی و داروها

1-17-1- فاکتورهای مؤثر در ترشّح دارو و ورود آن به داخل شیر

1-17-2- مکانیزم انتقال داروها به داخل شیر

1-17-3- دسته داروها بر حسب مضر یا بی ضرر بودن در طی شیردهی

1-17-3-1- دسته داروهای بی‌ضرر در طی شیردهی

1-17-3-2- دسته داروهایی که در طی شیردهی کمتر ایمن هستند

1-17-3-3- دسته داروهایی که در طی شیردهی خطرناک هستند

1-17-4- موارد قابل ذکر در مورد مصرف داروها در طی شیردهی

1-17-5- دم کرده‌های گیاهی بی‌ضرر در طی شیردهی

1-17-6- اشعه X و اسکن‌ها در طی شیردهی

فصل دوم : محرکهای شیردهی (گیاهی و شیمیایی)

2-1- گیاهان داروئی محرک شیردهی

2-2- قطره گیاهی شیرافزا

2-2-1- مواد مؤثره گیاهان موجود در قطره شیرافزا

2-2-2- فارماکولوژی

2-3- محرکهای شیمیایی: داروهای محرک شیردهی

2-3-1- متوکلوپرامید، دارویی با عارضه جانبی شیرافزایی

فصل سوم : بررسی آماری و نتایج

3-1- مطالب جمع‌آوری شده حاصل از نظریات 200 پزشک (متخصص زنان، اطفال و ماما)

3-1-1- بررسی معیارهای پزشکان در مورد سنجش کافی بودن میزان شیر مادر

3-1-2- بررسی علل ناکافی بودن میزان شیر مادر

3-1-3- موارد ذکر شده به منظور افزایش شیردهی در درجه اول

3-1-4- بررسی آمار بدست آمده از پزشکان (بر حسب درصد)

3-1-5- علل تجویز فرآورده های خوراکی متوکلوپرامید

3-1-6- علل تجویز قطره شیر افزا

3-1-7- علل عدم تجویز فرآورده های خوراکی متوکلوپرامید توسط آن دسته از پزشکان که آنرا تجویز نمی‌کنند

3-1-8- علل عدم تجویز قطره شیرافزا توسط آن دسته از پزشکان که آنرا تجویز نمی‌کنند

3-1-9- سایر موارد دارویی تجویز شده به منظور افزایش شیر مادر

3-2- ترسیم نتایج حاصل به صورت جدول و نمودار ستونی

3-3- استفاده از روش آماری مجذور خی

3-4- آزمون فرض صفر و مقابل و ترسیم جدول فراوانی‌های مورد انتظار بر اساس آن

3-5- فرمول مجذور خی و محاسبات

فصل چهارم : بحث و نتیجه‌گیری

خلاصه انگلیسی

فصل پنجم : مراجع

بررسی تاثیر عصاره جوز بدون داروی PTZ و عصاره خرزهره به همراه پنتیلن تترازول در بروز رفتار ترس - 165 صفحه فایل ورد word

اختصاصی از فایلکو بررسی تاثیر عصاره جوز بدون داروی PTZ و عصاره خرزهره به همراه پنتیلن تترازول در بروز رفتار ترس - 165 صفحه فایل ورد word دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

مواد و روشها

2-1-حیوان آزمایشگاهی

برای انجام این پژوهش از موش های بزرگ آزمایشگاهی (Rat) نر بالغ از نژاد Wistar با میانگین وزنی 20±200 گرم استفاده گردید. این موش های بزرگ با وزن 120 گرمی از انستیتو رازی در حصارک کرج تهیه گردیده و سپس به حیوان خانه دانشگاه علمی-کاربردی رسول اکرم منتقل شدند وموشها در قفس های مخصوص نگهداری رت، به صورت گروه های 4-3 تایی نگهداری شده، آب و غذای مخصوص(پلت) که از شرکت خوراک حیوانات آزمایشگاهی جوانه خراسان از مشهد تهیه شده بود، به میزان کافی در دسترس آنها قرار گرفت. محل نگهداری حیوانات از نظر شرایط فیزیکی دارای دوره روشنایی – تاریکی 12 ساعته (7 صبح تا 7 شب ) و دمای 2±22 درجه سانتیگراد بدون هر گونه سرو صدا و آلودگی صوتی بود. درجه رطوبت نیز ثابت نگه داشته شد. بعد از به وزن رسیدن در این مکان و پس از ضدعفونی کردن کامل محل حیوان خانه دانشگاه آزاد واحد دامغان به این مکان منتقل شدند و در این مکان نیز دقیقا نکات فوق رعایت شد. برای آنکه استرس و ترس ناشی از جابه جایی حیوانات از بین برود و در مکان جدید عادت و سازش پیدا کنند، یک هفته به حیوانات زمان داده شد.

آزمایشات مورد نظر در زمان معینی از روز انجام می گرفت.

شکل2-1-1- موش آلبینو نر نژاد ویستار

2-2 وسایل  و ابزارهای آزمایشگاهی مورد نیاز جهت انجام آزمایش

1- ترازوی Ohaus جهت وزن کردن موش ها با دقت یک دهم گرم.

2- تیغ اصلاح جهت اصلاح نمودن موهای سر حیوان.

3- تعداد زیادی سرنگ انسولینی یک میلی لیتری برای تزریق دارو (به تعداد هر حیوان یک عدد )

4- لوازم تشریح (قیچی، اسکالپل، گیره، پنس، ظرف تشریح و غیره)

5- تعداد زیادی سرسرنگ Gauge 21 از جنس فولاد زنگ نزن برای ساخت کانول تزریق.

6- ابزار کولیس با دقت 5/0 میلی متر.

7- تیغ موکت بری (Cutter)

8- کاغذ سمباده.

9- چراغ مطالعه.

10- پیچ های ظریف عینک به تعداد زیاد به منظور تثبیت سیمان دندانپزشکی و کانول راهنما برروی استخوان جمجمه.

11- پیچ گوشتی عینک و پنس ظریف مخصوص جهت نگهداری پیچ های مورد نظر.

12- سرمته دندانپزشکی به قطر 7/0 و 1 میلی متر جهت سوراخ کردن استخوان جمجمه.

13- پنبه استریل و سواپ به مقدار مورد نیاز.

14- دستگاه استریوتاکس مدل Stoelting  ساخت شرکت Stoelting آمریکا با استفاده ازاین دستگاه موش برای انجام عمل جراحی و کانول گذاری در ناحیه بطن کاملا ثابت نگه داشته می شد.

15- سرنک هامیلتون ساخت چین با حجم 5 میکرو لیتر.

16- سرسرنگ Gauge27 دندانپزشکی برای ساخت کانول تزریق.

17- لوله پلی اتیلنی به عنوان رابط بین سرنگ هامیلتون و کانول تزریق.

18- ترازوی Sartorius analytic برای وزن کردن داروها با دقت یک ده هزارم گرم.

19- ظروف شیشه ای درب دار استریل جهت تهیه مواد شیمیایی و عصاره.

20- دستگاه روتاری ( جهت حذف حلال).

21- قیف بوخنر.

22- بن ماری.

23- بوته چینی.

24- دستگاه Elevated Plus-maze از جنس چوب.

25- سه عدد کورنومتر دیجیتال جهت اندازه گیری زمان توقف موش ها در هر بازوی دستگاه Elevated Plus-maze و همچنین یک عدد ساعت شماطه ای برای تنظیم نمودن زمان ثبت.

26- ظروف شیشه ای یا پلاستیکی جهت نگهداری مغز حیوان.

2-3-مواد و داروهای مورد نیاز

1- 10% Chetamine و 2% Xylazine ساخت شرکت داروهای دامپزشکی ایران، به عنوان داروی بیهوشی.

2- عصاره الکلی 50% دانه گیاه جوز بوآ.

3- پنتیلن تترازول (PTZ) تهیه شده از شرکت SIGMA USA , USA .

4- الکل طبی 96 درصد.

5- آب مقطر.

6- سرم فیزیولوژیک 9/0 درصد نمکی (نرمال سالین).

7- بتادین برای ضد عفونی کردن محل جراحی.

8- سیمان دندانپزشکی ( پودر آکریل ) و محلول منومر خودپخت (صنایع پزشکی مارلیک ) جهت تثبیت کانول راهنمای ساخته شده.

9- کلروفرم یا اتر جهت کشتن حیوان پس از اتمام آزمایش.

10- فرمالین 10% برای تثبیت بافت مغز.

11- پنیسیلین 1.200.000 به مقدار نیاز.

2-4- گیاهان

گیاه جوزبویا به دلیل بومی بودن در هند به صورت خشک تهیه شد. همچنین گیاه خرزهره نیز به دلیل بومی بودن در آسیا به راحتی از دامغان تهیه و به لحاظ بیوسیستماتیکی نیز جنس و گونه این گیاهان توسط بخش بیوسیتماتیک دانشکده فردوسی مشهد مورد تایید قرار گرفت.(Myristica fragrans) و (Nerium oleander )

2-5- روش عصاره گیری

جهت عصاره گیری از جوزبویا و خرزهره از روش خیساندن الکلی با درصد الکل 50 برای گیاه جوزبویا و برای گیاه خرزهره از درصد الکل 70 تهیه شد(106).